目前，全球获批的RSV疫苗为GSK的RSV疫苗Arexvy和辉瑞的RSV疫苗Abrysvo。GSK公布的三季度数据显示，Arexvy大卖7.09亿欧元。辉瑞的RSV疫苗Abrysvo成为公司增长最快的品种，第一季度销售3.75亿美元，大大超出市场预期。海外RSV市场的火爆，进一步点燃了国内外企业开发重组亚单位疫苗和mRNA疫苗的热情。  近岸蛋白以创新的蛋白原料和完善的服务为基础，为RSV重组亚单位疫苗和mRNA疫苗研发提供全流程解决方案。

RSV是一种高度流行的、传染性很强的呼吸道病毒，是导致支气管炎和肺炎的主要原因，儿童、老年人易受感染。每年，RSV导致近6万儿童死亡。仅在美国，RSV每年导致1.4万老年人死亡^[1]。中国需RSV预防人数近4亿，高风险老年患病人数约500万。
 

RSV蛋白结构

RSV是一种包膜病毒，编码11种蛋白质，包括非结构蛋白NS1和NS2、核蛋白N、粘附糖蛋白G和融合蛋白F等，其中G蛋白和F蛋白是RSV的两个主要保护性抗原^[2]。

^{F蛋白在RSV毒株中高度保守，使其成为一个很好的潜在疫苗靶点。F蛋白以三聚体形式存在，有两种构象，融合前Pre-F和融合后Post-F，Pre-F虽然稳定性较差，但免疫原性更强。目前在Pre-F中已鉴定出7种抗原表位(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ø和Quaternary -Dependent)，以及可以和不同表位结合的抗体[3,4]。}

 1. RSV重组亚单位疫苗

1.1 早期研发

针对早期研发，近岸蛋白可以为候选分子设计、筛选及优化、免疫原性评价提供相关服务和产品。从免疫原性预测、病原体亚型覆盖、蛋白质结构改造、多联多价设计等角度，开展候选分子设计工作。除提供高通量抗原表达服务外，近岸蛋白还为各种筛选实验提供RSV Pre-F和G蛋白、RSV Pre-F抗体（结合表位Ø）、RSV F抗体（结合表位I或II或III或Quaternary）、荧光标记Pre-F抗体、荧光标记F抗体、G蛋白抗体、RSV Pre-F ELISA kit、中和抗体对照品等。

 1.2 CMC生产在疫苗生产过程阶段，近岸蛋白可以提供表达细胞株构建、工业菌株构建、发酵及纯化工艺开发等服务和GMP级全能核酸酶。  1.3 CMC质量控制在疫苗的生产和质控过程中，近岸蛋白提供FDA DMF备案的GMP级全能核酸酶BenzoNuclease^®（目录号：GMP-1707）及配套酶残留检测试剂盒（目录号：PA018），高效去除核酸残留。
此外，近岸蛋白还提供HCD检测试剂盒及数字PCR预混液，多种检测试剂可供选择。1.4 体外药效评估在疫苗的体外药效评估阶段，近岸蛋白可以提供生物学活性验证（细胞、小动物）、细胞与体液免疫评价相关抗原、抗体、试剂盒。  

RSV重组亚单位疫苗研发相关部分产品

货号	产品名称	应用
DA101	RSV Pre-F Antibody (3C12), Epitope Φ	用于抗原评价，ELISA、FLow验证
DA091	RSV F Antibody (11A9), Epitope II	用于抗原评价，ELISA、WB、FLow验证
DA102	RSV F Antibody (4D5), Epitope I	用于抗原评价，ELISA验证
DA092	RSV G Antibody (2G7)
/	RSV Pre-F ELISA kit	用于抗原评价
DA101FL	FITC RSV Pre-F Antibody (3C12), Epitope Φ	用于抗原评价，FLow验证
DA091FL	FITC RSV F Antibody (11A9), Epitope II
/	中和抗体对照品	对照
DRA230	RSV Prefusion F-trimer Protein (strain A2)	抗原标准品，ELISA验证
DRA231	RSV G Protein (strain A2)
GMP-1707	BenzoNuclease®, GMP Grade	去核酸残留
PA018	BenzoNuclease® ELISA Kit	酶残留检测

 2. RSV mRNA疫苗2.1 早期研发

• 抗原/mRNA序列设计服务

基于上万种蛋白设计经验和文库优势，近岸蛋白可进行抗原设计，亦可对mRNA的UTR、密码子、Poly(A)尾、IRES序列优化等进行序列优化。

• 疫苗候选分子筛选确认

产品	服务
RSV抗原/RSV检测抗体	高通量基因合成
细胞免疫（RSV抗原）	高通量质粒制备
体液免疫评估（RSV抗原）	高通量mRNA制备
质粒制备用PCR/克隆试剂	高通量LNP包封
	兔多抗制备
	免疫效价检测

 

2.2 CMC生产

近岸蛋白提供mRNA合成及修饰用原料酶及试剂。所有产品均采用药用规格原辅料生产，符合GMP规范的产品生产与质量管理规程，保障生产过程及所有原辅料可追溯。

 

产品特点：

• 为客户提供全套的原料放行方案，全套酶产品已完成FDA DMF申报备案，通过HALAL清真认证

• GMP级生产管理体系，设计50亿人份产能

• 100余家国内外客户的信任之选，其中2家客户产品获国内外EUA

   

质粒线性化	体外转录	加帽修饰	加尾修饰
BsaI	T7 RNA Polymerase	Vaccinia Capping Enzyme	E.coli Poly(A) Polymerase
BspQI	RNase Inhibitor	2´-O-Methyltransferase
XbaI	Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)	SAM
	T7 RNA Transcription Enzyme Mix
	NTPs
	N1-Me-pUTP/pUTP
	CAP1 GAG/CAP1 GAG(3'OMe)

并提供CMC生产服务，涵盖大规模质粒制备、大规模mRNA制备、LNP-mRNA包封及工艺开发。

2.3 CMC质量控制

产品	服务
加帽率检测样品处理试剂盒	完整性/加帽率/加尾检测
RNase H/RNase T1/Oligo(dT)磁珠	dsRNA/DNA等残留检测
原料酶/DNase/RNase残留检测试剂盒	包封率/粒径/zeta电位检测
E.coli DNA 残留检测试剂盒/兼容数字PCR平台qPCR Mix

 

2.4 体外药效评估

在疫苗的体外药效评估阶段，近岸蛋白可以提供生物学活性验证（细胞、小动物）、细胞与体液免疫评价相关抗原、抗体、试剂盒及对照用mRNA。

 

对照用报告基因

eGFP mRNA	Luciferase mRNA	mCherry mRNA
eGFP circRNA	Luciferase circRNA

 基于高品质原料与成熟的技术平台，近岸蛋白可为SARS-CoV-2、Influenza A/B、RSV、VZV、RABV、MPXV、HSV、ASFV、PEDV、PRV、PRRSV等人和动物的创新疫苗研发与工艺研究提供解决方案，欢迎咨询。

 

 

参考文献

1.https://www.niaid.nih.gov/diseases-conditions/respiratory-syncytial-virus-rsv

2. Nam HH, Ison MG. Respiratory syncytial virus infection in adults. BMJ. 2019 Sep 10;366:l5021.

3. Gilman MS, et al. Characterization of a Prefusion-Specific Antibody That Recognizes a Quaternary, Cleavage-Dependent Epitope on the RSV Fusion Glycoprotein. PLoS Pathog. 2015 Jul 10;11(7):e1005035.

4. McLellan JS, et al. Graham BS. Structure of RSV fusion glycoprotein trimer bound to a prefusion-specific neutralizing antibody. Science. 2013 May 31;340(6136):1113-7.