截至目前，全球已有 9 款 CAR-T细胞治疗产品获批上市，中国以3款获批位居前列。在CAR-T药物生产工艺全流程中（一文详解: CAR-T研发生产全流程解决方案），CAR转导和CAR-T细胞扩增是关键的工艺开发步骤。如何更好地提高CAR基因的转导效率以及T细胞扩增率是工艺开发研究中的关键问题。

研究发现，在CAR基因导入和T细胞扩大培养的过程中，添加人纤连蛋白(fibronectin)可以增强逆转录病毒对哺乳细胞的转导效率，同时将纤连蛋白与CD3单抗联合使用可刺激T细胞扩增。近岸蛋白可提供GMP级重组人纤连蛋白—NovoNectin^®，无动物源，无安全风险，符合细胞治疗生产原料法规要求，资质文件齐全，性能优异，高效助力细胞治疗药物研发！

纤连蛋白增强病毒转染效率

1996年，Hanenberg, H., Xiao, X., Dilloo, D等人在《Nature Medicine》上发表“Colocalization of retrovirus and target cells on specific fibronectin fragments increases genetic transduction of mammalian cells”研究论文，研究结果表明逆转录病毒和靶细胞在特定纤连蛋白片段上的共定位增加了哺乳动物细胞的转导效率^【1】。

纤连蛋白提高T细胞扩增率

Chono, Hideto等研究者发现慢病毒转导与抗CD3 /CH-296共刺激是一种产生大量转基因T细胞的有效方法，可能适用于许多过继T细胞治疗。在研究中作者将CD3抗体与固定化的CH-296或CD28抗体以及抗CD3/CD28磁珠一起刺激人外周血单核细胞，并同时转染慢病毒载体。与CD28抗体相比，CH-296共刺激的转导效率更高。然后，用CD3抗体/CH-296或抗CD3/CD28磁珠刺激PBMCs并转导。分析T细胞扩增、基因转移效率和免疫表型。与抗CD3/CD28刺激法相比，抗CD3/CH-296刺激法细胞扩增率高10倍以上，基因转移效率高，且naïve表型守恒^【2】。

近岸蛋白产品介绍

NovoNectin^®是一个约63kDa的分泌性蛋白，包含三个功能结构域：细胞结合域（Cell binding domain；C-domain）、肝素结合域（Heparin binding domain；H-domain）和CS1位点。细胞表面VLA-4及VLA-5可分别与NovoNectin^®上的CS-1位点及细胞结合域（Cell binding domain；C-domain）结合，逆转录病毒颗粒可以与肝素结合域（Heparin binding domain；H-domain）结合，从而促进逆转录病毒和慢病毒对细胞的转染效率。

图1 NovoNectin^®增强病毒转导效率作用原理示意图

NovoNectin^®可高效促进T细胞黏附

Measured by its ability to support Jurkat cells attachment and spreading when used as a substratum for cell culture.

推荐产品

货号	产品名称
GMP-CH38	NovoNectin® GMP Grade
CH38	Recombinant Human NovoNectin®

  

近岸蛋白提供从CAR候选分子发现、目标细胞构建和培养、全流程质量控制到体外药效评价的细胞治疗研发全流程解决方案。公司可提供高活性靶点蛋白、GMP级细胞因子/激活性抗体、GMP级Cas9蛋白、GMP级全能核酸酶、GMP级mRNA酶及试剂，类器官培养基等目录产品，以及CAR分子筛选、GMP级质粒/mRNA生产等定制化服务，助力细胞治疗产业快速发展！

推荐GMP级产品及配套试剂

Cat. No.	Product Name
GMP-A018	Recombinant anti-Human CD3 mAb
GMP-A063	Recombinant anti-Human CD28 mAb
GMP-B038	anti-Human CD3/CD28 Beads
GMP-C013	Recombinant Human IL-2
GMP-CD47	Recombinant Human IL-7
GMP-C016	Recombinant Human IL-15
GMP-CC45	Recombinant Human IL-21
GMP-1647	Tscm Expander® 记忆T干细胞扩增因子
GMP-CH38	NovoNectin® GMP Grade
GMP-1707	BenzoNuclease® 全能核酸酶
GMP-1701	Recombinant Cas9 Nuclease, GMP Grade
PA018	BenzoNuclease® ELISA Kit
CT19	CARTEST® CD19检测试剂盒

参考文献

【1】Hanenberg, H et al. “Colocalization of retrovirus and target cells on specific fibronectin fragments increases genetic transduction of mammalian cells.” Nature medicine vol. 2,8 (1996): 876-82. doi:10.1038/nm0896-876

【2】Chono, Hideto et al. “Optimization of lentiviral vector transduction into peripheral blood mononuclear cells in combination with the fibronectin fragment CH-296 stimulation.” Journal of biochemistry vol. 149,3 (2011): 285-92. doi:10.1093/jb/mvq135