2023年6月15日，罗氏（Roche）旗下基因泰克（Genentech）宣布，美国FDA已批准Columvi™ （Glofitamab-gxbm）用于复发或难治性（R/R）弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）或由滤泡性淋巴瘤引起的大B细胞性淋巴瘤（LBCL）成年患者的治疗，适用患者经过二线或多线的系统治疗。Columvi（Glofitamab-gxbm）是一款同时靶向CD3与CD20的双特异性抗体，可靶向T细胞表面的CD3和B细胞表面的CD20。

 

图1. 信息来源于Genentech官网

 

CD20是33-37 kDa非糖基化蛋白，属于MS4A蛋白家族（四次跨膜蛋白家族A）。CD20蛋白由四个疏水跨膜结构域组成，一个胞内结构域和两个胞外结构域（大环和小环），N端和C端均位于胞质内。由于磷酸化不同CD20产生三种异构体（33, 35 and 37 kDa），据报道，增殖的恶性B细胞中的CD20磷酸化高于静息B细胞。^[1]CD20在正常和恶性B淋巴细胞表面表达，而在造血干细胞、血浆细胞和其他正常组织中不表达。因此，CD20 被认为是一个治疗B细胞恶性肿瘤及自体免疫疾病的重要靶点。

 

早在1997年，美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration, FDA）批准了抗CD20抗体美罗华（Rituximab，利妥昔单抗注射液）上市，这是治疗B细胞恶性肿瘤的一个突破性进展，证明了单克隆抗体可用于癌症治疗。在利妥昔单抗成功的基础上，新的工程抗CD20单克隆抗体Ofatumumab和Obinutuzumab被开发出来。临床前研究表明，这些新的抗CD20单克隆抗体在某些作用机制上优于Rituximab。抗CD20单克隆抗体通过多种机制起作用，包括补体依赖的细胞毒作用(complement-dependent cytotoxicity, CDC)，补体依赖性细胞介导的细胞毒性(complement-dependent cellular cytotoxicity, CDCC)，抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cellular phagocytosis ADCP)，抗体依赖性细胞毒性作用(antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC)，以及直接诱导细胞凋亡^[1]。

 

图2. 抗CD20单克隆抗体已知的多种作用机制^[1]

 

CD20单抗可诱导抗体依赖性细胞毒性/吞噬作用(ADCC/ADCP)、CDC或PCD。根据它们的作用机制，CD20单抗被分为Type I或Type II^[2]。Rituximab是第一代CD20单克隆抗体，也是一种重组人鼠嵌合抗体，属于I型单抗。Ofatumumab是一种I型人源化抗CD20单克隆抗体，其结合表位与Rrituximab不同。与其他CD20单抗相比，Ofatumumab结合表位更接近细胞表面，结合位点更广。Ofatumumab还拥有一个C1q的结合位点，介导了增强的CDC活性。Obinutuzumab是一种II型人源化抗CD20单克隆抗体，可诱导细胞直接死亡和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性。它有一个糖工程Fc区域，可以增强与免疫效应细胞Fc受体(FcR)的结合亲和力。由于II型抗体的特点是它们不局限于脂筏，因此与Rituximab和Ofatumumab相比，CDC降低了^[3]。

 

图3.抗CD20单克隆抗体结合表位图^[3] 

 

图4. 不同抗CD20单克隆抗体作用机制^[3]

 

除了CD20单抗之外，2020年末上海隆耀生物的LY007细胞注射液获得临床默示许可，也是国内shouge获得临床批件的CD20靶点的CAR-T产品；另外，西比曼生物科技有限公司也在开发CD20 CAR-T疗法。2021年11月，罗氏CD20/CD3双特异性抗体在中国启动临床；2021年12月，博锐生物三特异性抗体BR110的临床试验申请获国家药品监督管理局批准，这是全球shouge获批临床的CD3/CD19/CD20三抗产品，该产品由恩沐生物开发。由此可见，靶向CD20的单抗、双抗、三抗以及CAR-T疗法研究火热，越来越多的公司参与布局。

 

靶向CD20药物批准/申请上市表

 

CD20属于四次跨膜蛋白，结构复杂，表达和纯化出完整的CD20重组蛋白难度非常大。近岸蛋白采用多次跨膜蛋白开发平台中的去垢剂技术平台，现研发出CD20全长蛋白，经过ELISA和BLI数据验证，可用于动物免疫、靶向药物发现、筛选、质控、放行等各个环节。

 

推荐产品：

 

 

Recombinant Human CD20 (C-Flag) (Cat.No.C17G)

 

Immobilized Human CD20-Flag (Cat#C17G) at 2μg/ml (100 μl/well) can bind Anti-Human CD20 mAb (Cat#NC071) . The ED50 of Anti-Human CD20 mAb (Cat#NC071) is 11.09 ng/ml.

 

 

Loaded Anti-Human CD20 mAb-Fc (Cat#NC071) on AHC Biosensor, can bind Human CD20-Flag (Cat#C17G) with an affinity constant of 3.47 pM as determined in BLI assay. 

 

 

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参考资料：

[1] Pavlasova G , Mraz M . Review: The regulation and function of CD20: an "enigma" of B-cell biology and targeted therapy[J]. Haematologica, 2020, 105(6).

 

[2] Meyer S , Evers M , Jansen J , et al. New insights in Type I and II CD20 antibody mechanisms-of-action with a panel of novel CD20 antibodies[J]. British Journal of Haematology, 2018. 

 

[3] Basu, Biswanath et al. New and Old Anti-CD20 Monoclonal Antibodies for Nephrotic Syndrome. Where We Are?[J]. Frontiers in immunology, 2022.