一、novoprotein DNA Marker特点：

• 每个条带均为单独定量制备
• 可以用于 DNA片段大小和浓度的判断
• 带型清晰明亮、条带大小准确，覆盖范围广（100bp-10kb）
• 明暗条带优化比例，条带更美观
• 内含上样缓冲液和指示染料可直接上样、快捷方便
• 添加了特定稳定剂，稳定性高，于-20℃可保存两年以上
• 适用于 TAE 和 TBE缓冲体系
• 可以任选指定条带定制DIY DNA Marker
• 价格优势明显
   

二、如何选择novoprotein DNA Marker
如图为novoprotein 在售的18种DNA Marker，可以根据您的目的片段大小，选择附近条带较密的marker，这样对目标片段大小的估计较准确。两个不同目的带同时电泳时，尽量选择同时可以标定两个目的片段的marker。如果您的实验有特殊条带需求，我们还可以为您提供DIY DNA Marker定制服务。
 

三、novoprotein DNA Marker使用方法及注意事项

使用注意事项：

• 建议选择合适浓度的琼脂糖凝胶（DNA片段越短胶浓度越大：<0.5k，胶浓度1.2-1.5%；>10kb浓度，0.3-0.7%；0.5<DNA<10kb，胶浓度为0.8-1.0%）
• DNA Marker使用前彻底化冻并混合均匀
• 取5 μl直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中（约每1 mm点样孔宽度加1 μl）进行电泳
• 低电压下不受场强影响，分离效果好。一般电压4-10v/cm，大片段电泳时注意控制电压。
•  及时更换电泳缓冲液

保存注意事项：

4℃保存3个月以上，-20℃保存2年。（如客户电泳使用频繁可于室温随时使用，但我们推荐客户于4℃存放）
DNA Marker 加样时尽量使用新枪头，避免核酸酶污染

四、DNA Marker使用问题解析

• 条带模糊 

原因	解决方案
凝胶浓度不合适	根据片段长短选择合适的凝胶浓度
电泳缓冲液缓冲能力差	反复使用后缓冲能力下降需及时更换
电压过高时间过长	电压不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30℃
上样量过多	减少上样量以marker条带为准条带更清晰
电泳胶质量不好	选择好胶粉充分溶胶
Marker降解	防止核酸酶污染，确保保存温度和时间

• 
  亮度不够或不均一

原因	解决方案
上样量少	可适度增加上样量
EB浓度低	按照要求加入EB，一般为终浓度0.5-1ug/ml
凝胶不均匀，胶质过厚	充分煮胶至透明无杂质和丝状物，倒胶均匀适量
电泳胶亮度不均一	电泳时间过长时，琼脂糖胶前部EB会迁移至胶后部，造成前后DNA染色亮度不一，可在电泳开始前，在琼脂糖胶前部，靠近电泳槽阳极附近加入少量EB并混匀。

• 
  条带污染

原因	解决方案
污染核酸外切酶至DNA降解	使用灭菌的枪头，及时盖紧管盖
点样时污染	加样时及时更换枪头

详细说明参见公司网站：www.sinobio.net

 

五、Marker条带比较分析

对市场上热销DNA Ladder 2000同类型产品调查对比见下表：

公司名称	次数	目录价	定量条带(标称)	普通条带(标称)	备注
Takara	40	85	30ng/ul	10ng/ul	5ul电泳，亮带150ng,其余50ng
康为世纪	50	48	30ng/ul	10ng/ul	5ul电泳，亮带150ng,其余50ng
东盛	60	90	30ng/ul	15ng/ul	5ul电泳，亮带150ng,其余75ng
SinoBio	50	70	20ng/ul	10ng/ul	5ul电泳，亮带100ng,其余50ng
全式金	50	70	20ng/ul	10ng/ul	5ul电泳，亮带100ng,其余50ng
天根	50	90	17ng/ul	8ng/ul	6ul电泳，亮带100ng,其余50ng

 

由表中可以看出，我们的marker浓度在市场上位于中等水平，从价格来看也比较有优势，且我们的活动力度较大。（目前marker产品，买二送二）

为了取得美观的DNA Marker电泳分布图谱，我们在产品制备过程小幅度调整了非定量条带的浓度，结果使定量条带更醒目，相对其他条带更易区分。

• 
  Marker条带电泳图谱比较

 
 

• 1、Novoprotein新产品DNA Ladder 2000 plus II
• 2、Novoprotein DNA Ladder 2000
• 3、T 1公司同类型 Marker DL2000
• 4、T 2公司同类型 Marker D2000

 

 

 

(1%琼脂糖胶，2ul电泳可见novoprotein DNA marker条带清楚，带型美观。)