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特异性Fab加工酶——高效制备Fab 和F(ab’)2

发布时间:2016-03-25 16:30 |  点击次数:

 

特异性Fab加工酶——高效制备Fab F(ab’)2

木瓜蛋白酶(papain)能够在中性pH值缓冲液中将IgG分子酶切形成两个Fab分子及一个Fc分子。实际实验当中使用木瓜蛋白酶酶切抗体,电泳胶图上能够观察到明显的非特异性切割产生的杂带,这直接导致Fab 回收率的降低,也使得纯化回收得到高纯度Fab比较困难。

胃蛋白酶(pepsin)在酸性条件下切割抗体,获得F(ab’)2,实际实验当中需要探索尝试最佳酶切条件包括pH,酶切时间,酶的用量。即使是优化了酶切条件,酶切效率有可能还是不高。而且大部分抗体在pH 4-5的酶切体系里都有损失,最终F(ab’)2的回收率较低。

特异性Fab加工酶,能够高效制备Fab F(ab’)2。首先酶切反应都是在中性pH值缓冲液体系中进行;酶切反应在半小时到1小时之内可以达到90%以上的切割效率;酶切特异性高,在保障Fab F(ab’)2活性的基础上,大大提高了切割后的回收效率。

NovoF(ab’)2 (Cat.No. PE016)

NovoFab (Cat.No. PE015)























NovoF(ab’)2 (Cat.No. PE016)酶切IgG1抗体实验示例


NovoFab (Cat.No. PE015)酶切IgG1抗体实验示例

           

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